악성 흑색종은 사망률의 80%를 차지하는 매우 공격적인 피부암으로, 전이성 흑색종 환자의 전체 중간 생존 기간은 6-9개월에 불과합니다. 단일 나노캐리어에 이중 약물을 동시 투여하는 병용 치료가 암 퇴치에 우아하고 효과적임이 입증되었습니다. 본 연구에서는 FDA 승인 흑색종 치료제 다카바진(DBZ)과 유망한 항암제 전-트랜스 레티노산(ATRA)을 지질 나노제형(RD-LNF)에 탑재하여 악성 흑색종 신규 치료 전략으로 활용했습니다. 두 약물을 지질 나노제형에 성공적으로 캡슐화하고 시간이 지남에 따라 조절된 약물 방출을 보였습니다. DBZ와 ATRA의 동시 전달이 농도 의존적으로 세포 증식을 효과적으로 감소시킬 수 있음을 입증했습니다. 병용 나노입자는 B16F10 흑색종 세포의 집락 형성 능력을 유의하게 감소시켰습니다. 유세포 분석 결과 RD-LNF가 유의한 세포 주기 진행 억제와 세포 이동 억제와 함께 더 높은 비율의 세포자멸사 세포를 유도했습니다. 이러한 결과는 RD-LNF가 높은 효능으로 악성 흑색종 치료에 유망한 잠재력을 가짐을 시사합니다.
악성 흑색종은 주로 인간 피부에서 발생하는 공격적인 악성 종양 중 하나입니다[1]. 흑색종은 전체 피부암의 4%를 차지하지만 피부암 사망률의 80%를 담당하며 저개발국과 개발도상국에서 증가하는 우려 사항입니다[2, 3]. 흑색종은 뇌, 심장, 폐 등 신체 다양한 부위로 전이 경향이 높아 가장 공격적인 악성 종양 형태 중 하나입니다[4]. 조기 진단 시 수술적 절제가 잠재적 치료 옵션입니다. 그러나 수술적 개입이 흑색종 완전 회복을 보장하지는 않습니다[5]. 게다가 이 악성 종양의 방사성 성장기는 화학요법과 방사선요법을 포함한 대부분의 다른 치료 옵션에 내성이 됩니다[6]. 구체적으로, 펩타이드 수용체가 흑색종 암세포 표면에서 과발현되어 매력적인 표적이 됩니다. 소마토스타틴 수용체 아형 2(SSTR2)가 흑색종 세포에서 고발현됨이 밝혀졌습니다[7].
다카바진(DBZ) 또는 디메틸-트리아제노-이미다졸 카르복사마이드(DTIC)는 식품의약국(FDA) 승인 유일한 1차 화학요법 약물입니다[8]. DBZ는 암세포 DNA나 핵물질에 알킬기를 첨가하여 암세포를 사멸시키는 강력한 알킬화제입니다[9]. 강력한 작용에도 불구하고 DBZ는 낮은 수용성과 혈중 짧은 반감기(41분)로 인해 흑색종 악성 종양 치료에서 치료 효과가 감소합니다[10]. 게다가 10-25% 사이의 실망스러운 반응률과 5% 미만의 완전 암 회복으로 단일 약제 치료의 한계가 나타납니다[11, 12]. 따라서 DBZ 치료 효능을 개선하기 위한 대체 전략 개발이 시급합니다.
단일 투여로 다중 치료제를 공동 전달하는 것이 개별 치료제보다 더 효과적임이 입증되었습니다[13]. 단일 캐리어 시스템에서의 치료제 공동 전달은 시너지 활성, 유사한 약동학적 특성, 더 높은 항암 효능을 부여합니다[14]. 전-트랜스-레티노산(ATRA)은 여러 암 치료에 사용되는 유망한 항암제입니다[15]. ATRA는 암세포 핵 내 레티노산 수용체에 결합하여 성장, 증식, 분화 억제 및 최종적 세포 사멸로 치료 효능을 나타냅니다[16]. 다른 화학요법제와 달리 ATRA는 심장독성이나 골수 형성 저하 같은 부작용을 일으키지 않습니다. ATRA는 적절한 화학요법제와 병용 시 항암 효능을 향상시키는 것으로 보고되었습니다. 또한 지용성 ATRA는 낮은 수용성과 빠른 전신 청소율로 안정적 전달 시스템이 필요합니다[17].
나노입자 전달 시스템은 향상된 투과성 및 잔류 효과(EPR)를 이용하여 표적 종양 조직에서 약물을 방출하고 전신 순환에서 오프타겟 효과를 회피함으로써 캡슐화된 치료제의 치료 효능을 개선하는 것으로 나타났습니다[18, 19]. 고체 지질 나노입자(SLN)는 향상된 안정성, 조절된 약물 방출, 높은 약물 로딩 효율, 제조/스케일업 용이성 등 두드러진 특징으로 리포좀이나 미셀 등 기존 캐리어의 대안으로 간주됩니다[20]. 약물 전달 캐리어로 SLN의 중요한 측면 중 하나는 GRAS 지위를 가진 지질의 안전성 프로파일로, 잘 견디며 생리적 지질입니다[21]. 지질 핵에 약물을 안정적으로 혼입하면 수용성이 개선되고 약동학적 프로파일이 향상되며 전신 순환에서 생리적 안정성이 연장됩니다[22].
본 연구에서는 흑색종 악성 종양에서 병용 치료를 위해 지질 나노제형을 이용한 DBZ와 ATRA 공동 전달의 유망한 전략을 다룹니다. DBZ는 지질 핵에 로딩될 것으로 예상되며 ATRA는 나노입자 구조의 일부가 될 것으로 예상됩니다. 결합 나노입자의 물리화학적 특성, 세포 섭취, 체외 세포독성을 연구했습니다. 또한 항암 효과를 세포자멸사 분석, 세포 주기 분석, 집락 형성, 세포 이동 분석으로 추가 평가했습니다.
결론적으로, 우리는 다카바진과 전-트랜스 레티노산 로딩 지질 나노제형을 성공적으로 제조했습니다. 우리 결과는 RD-LNF가 흑색종 세포 증식을 억제하고, 현저한 세포자멸사를 유도하며, 세포 주기 진행과 세포 이동을 억제함을 명확히 입증합니다. 향후 연구는 임상적으로 관련 있는 동물 모델에서 항암 효능 연구와 흑색종 악성 종양을 향한 표적 치료 개발에 초점을 맞출 것입니다. 이는 흑색종 세포에서 수행된 예비 연구이며, 다양한 임상적으로 관련 있는 동물 모델에서의 광범위한 연구가 우리 연구 작업의 다음 단계입니다.
약물 로딩 지질 나노입자는 초음파법으로 제조했습니다. 간단히, 10 mg DBZ와 10 mg ATRA를 50 mg 난황 레시틴(PC)과 2 mg DSPE-메틸(폴리에틸렌 글리콜)-2000(mPEG₂₀₀₀)을 함유한 2 mL 클로로포름 용액에 용해했습니다. 유기 용매를 아르곤 가스 노출로 20분간 건조했습니다. 건조된 약물+지질 혼합물에 80 mg 트리미리스틴(Tm)을 첨가하고 65°C에서 1시간 배양했습니다. 이 오일 혼합물에 4% 폴록사머 용액 5 mL를 첨가하고 즉시 80 W로 6분 프로브 초음파 처리했습니다. 결과 에멀전을 얼음에서 30분 냉각했습니다. 나노입자를 Amicon Ultra 0.5 원심 필터 장치(3 kDa 컷오프; Merck, Germany)로 12000×g, 20분 원심분리했습니다. 여과액의 자유 DBZ와 ATRA 양을 HPLC 법으로 평가하고 로딩 효율과 로딩 용량을 계산했습니다. Waters HPLC 시스템(Waters 1525 바이너리 펌프, Waters 2487 UV 검출기, Waters 2475 형광 검출기, 1500 컬럼 히터, Symmetry C18 컬럼)을 약물 분석에 사용했습니다. ATRA의 경우 이동상은 아세토니트릴과 트리플루오로아세트산을 90/10 v/v 비율로, 유속 1 mL/min, 348 nm에서 검출했습니다. DBZ의 경우 아세토니트릴과 0.05 M 인산이수소나트륨을 30/70 v/v 비율로 0.5% TEA 함유, 이동상 pH 3.7 유지, 유속 1 mL/min 사용했습니다.
결합 나노입자의 입자 크기 분포를 Malvern Zetasizer Nano ZS90(He-Ne 레이저, 633 nm)으로 평가했습니다. 모든 시료를 증류수로 희석하고 24°C에서 3회 반복 실험했습니다. 나노입자 형태는 투과 전자 현미경(TEM; JEOL JEM200CX, 120 kV)으로 평가했습니다. 희석된 입자를 2% 인산텅스텐산으로 염색, 건조 후 TEM으로 관찰했습니다.
캡슐화된 약물 방출을 투석법으로 평가했습니다. ATRA 1 mg과 DBZ 1 mg에 해당하는 2 mL 약물 로딩 나노입자를 투석 막(Spectra/Por, MWCO 3.5 kDa)에 밀봉했습니다. 투석 튜브를 25 mL 방출 완충액에 넣고 37°C에서 100 rpm 회전시켰습니다. 72시간까지 정해진 시간 간격으로 1 mL 시료를 채취하고 동량의 신선한 완충액으로 교체했습니다. DBZ와 ATRA 양을 위 HPLC 법으로 평가했습니다.
마우스 피부 흑색종 세포(B16F10)를 중국 세포주 자원 인프라(베이징, 중국)에서 구입했습니다. 세포를 10% FBS와 1% 항생제 혼합물을 보충한 RPMI-1640 배지에서 배양했습니다. 배지를 2일마다 정기적으로 교체하고 90% 컨플루언시 후 배양했습니다. 세포 섭취 분석을 위해 B16F10 세포를 6웰 플레이트에 24시간 배양했습니다. 나노입자는 형광 추적자로 쿠마린-6을 로딩했습니다. 오래된 배지를 제거하고 쿠마린-6-지질 나노입자를 함유한 신선한 배지로 교체하여 역순으로 1-3시간 배양했습니다. 세포를 세척하고 세포 스크래퍼로 긁어냈습니다. 1200 rpm, 5분 원심분리 후 세포 펠릿을 1 mL 차가운 PBS에 재현탁했습니다. 시료를 AccuriTM C6 유세포계(BD Co., USA)로 평가했습니다.
자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF의 B16F10 세포에 대한 세포독성 효과를 MTT 분석으로 평가했습니다. 세포(1 × 10⁴)를 96웰 플레이트 각 웰에 파종하고 24시간 배양했습니다. 세포를 먼저 서로 다른 농도의 자유 ATRA와 DBZ로 처리하고 흑색종 세포에 대한 항암 효과를 시험했습니다. 이어서 세포를 자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF 고정 농도 25 μg/mL와 50 μg/mL로 처리했습니다. 24시간 배양 후 배지를 조심스럽게 제거하고 PBS로 2회 세척했습니다. 마지막으로 세포를 5 mg/mL MTT 용액 100 μL로 처리하고 4시간 배양했습니다. 배양 배지를 조심스럽게 제거하고 100 μL 이소프로판올을 첨가하여 15분간 진동 조건에서 배양했습니다. 용해된 포르마잔 결정을 마이크로플레이트 리더로 570 nm에서 연구했습니다. 비처리 세포를 대조군으로 사용하고 대조군의 세포 생존율 기준으로 계산했습니다.
자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF의 B16F10 세포에서 세포자멸사 효과를 PE 앤넥신 V와 7AAD 기반 세포자멸사 키트 염색 후 유세포계로 평가했습니다. 세포를 12웰 플레이트에 웰당 2 × 10⁵ cells 밀도로 파종하고 24시간 배양했습니다. 세포를 자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF 제형 25 μg/mL 등가량으로 처리하고 비처리 세포를 대조군으로 했습니다. 24시간 처리 노출 후 제조사 프로토콜에 따라 염색했습니다. AccuriTM C6 유세포계로 PE와 7AAD 발현을 측정하고 최소 10,000 이벤트를 획득했습니다. PE 양성 및 7AAD 음성 세포는 초기 세포자멸사, PE 양성 및 7AAD 양성 세포는 후기 세포자멸사입니다.
세포를 12웰 플레이트에 웰당 2 × 10⁵ cells 밀도로 파종하고 24시간 배양했습니다. 세포를 자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF 제형 25 μg/mL 등가량으로 처리하고 비처리 세포를 대조군으로 했습니다. 24시간 후 처리된 세포를 세척하고 트립신화로 수집하여 70% 에탄올로 4°C에서 2시간 고정했습니다. 세포를 리보누클레아제로 처리하여 RNA 오염을 제거했습니다. 이제 세포를 요오드화 프로피듐(PI)으로 37°C에서 30분 염색했습니다. PI 염색 세포의 형광을 AccuriTM C6 유세포계로 측정했습니다. 세포 주기 단계를 subG1, G1, S, G2/M 단계로 나누었습니다.
세포를 12웰 플레이트에 웰당 2 × 10⁵ cells 밀도로 파종하고 24시간 배양했습니다. 세포를 자유 ATRA, DBZ, D-LNF, RD-LNF 제형 25 μg/mL 등가량으로 처리했습니다. 처리된 세포를 트립신화, 세척, 세포 계수기로 계수했습니다. 세포를 6웰 플레이트에 웰당 1500 cells 밀도로 파종했습니다. 37°C 주변 조건에서 12일간 배양하여 집락이 보일 때까지 기다렸습니다. 세포를 PBS로 세척하고 메탄올:아세트산:물(1:1:8)로 10분 고정 후 0.1% 크리스탈 바이올렛 염색으로 45분 염색했습니다. 염색된 세포를 광학 현미경으로 관찰했습니다.
8 μm 기공 크기의 12웰 트랜스웰 챔버를 사용했습니다. 연구 개시를 위해 5 × 10⁴ cells/well을 상부 챔버에 파종했습니다. 상부 배지는 FBS가 없고 하부 챔버 배지는 10% FBS로 구성했습니다. 24시간 후 하부 막 표면으로 이동한 세포량을 4% 파라포름알데히드로 고정하고 0.5% 크리스탈 바이올렛 염료로 염색했습니다. 무작위로 선택된 5개 시야에서 광학 현미경으로 세포 수를 계수하고 평균 세포 수를 기록하여 분석했습니다.
데이터는 평균 ± SD로 표시하고 별도 언급 없는 한 3회 반복 수행했습니다. 두 그룹 비교는 비대응 t-검정, 두 그룹 이상 비교는 일원분산분석(ANOVA)과 Tukey 다중 비교 검정으로 수행했습니다. 통계는 GraphPad Prism 소프트웨어로 수행했으며 p < 0.05 차이를 유의한 것으로 간주했습니다.
흑색종 치료는 여전히 주요 과제이며 화학요법, 방사선요법, 수술적 절제 등 표준 치료 옵션은 고체 덩어리 종양에만 효과적이며 예후가 불량합니다. FDA는 파클리탁셀이나 그 병용 등 약물을 승인했으나 환자 전체 생존율과 암 치유에 대한 전반적 영향 개선에 실패했습니다. 다카바진(DBZ)은 FDA 승인 1차 화학요법 약물이나, 열악한 물리화학적 특성으로 10-25% 사이의 실망스러운 반응률을 보입니다. 이러한 과제에 대처하기 위해 ATRA와 DBZ를 지질 나노제형에 병용하는 새로운 치료 전략을 개발했습니다(그림 1). 두 치료 성분 병용이 흑색종 악성 종양에서 항종양 효능을 향상시킬 것으로 가설했습니다. ATRA가 항암 특성을 보이지만 전신 환경에서 부작용을 일으키지 않음은 주목할 만합니다[23]. DBZ가 소수성인 특성을 고려하여 소수성 약물을 지질 핵에 안정적으로 혼입하고 ATRA를 나노입자 구조 성분으로 로딩할 수 있는 지질 나노제형을 설계했습니다. 치료 성분을 탑재한 지질 나노입자는 체내 깊은 종양까지 전달하는 데 도움이 됩니다. DBZ와 ATRA 로딩 효율은 각각 91.2 ± 1.25%, 95.8 ± 1.14%였습니다. RD-LNF에서 DBZ와 ATRA 로딩 용량은 각각 7.07 ± 0.65% w/w, 7.48 ± 1.05% w/w였습니다. D-LNF 입자 크기는 121.5 ± 1.65 nm, 폴리분산도 지수(PDI) 0.134, 제타 전위 -23.5 ± 0.85 mV였습니다. RD-LNF 입자 크기는 138.2 ± 1.28 nm, PDI 0.159, 제타 전위 -25.4 ± 0.58 mV였습니다. 전체 입자 크기 증가는 주로 ATRA 구조적 로딩에 기인하나, RD-LNF 최종 크기가 150 nm 미만으로 EPR 효과로 악성 흑색종 종양에 우선적으로 축적될 수 있습니다. 또한 친수성 PEG 존재가 입자 응집을 방지하고 망상내피계(RES) 섭취를 감소시켜 체내 전신 성능을 개선합니다. -25 mV 주변 표면 전하가 우수한 저장 안정성을 부여합니다. 입자 형태는 투과 전자 현미경(TEM)으로 조사했습니다(그림 2). 보듯 D-LNF와 RD-LNF 모두 완벽한 구형으로 구리 그리드에 고르게 분포되어 있습니다. D-LNF와 RD-LNF 크기 차이는 DLS 관찰과 일치합니다. 입자 파편, 작은 입자, 응집 부족은 제조 공정 성공을 나타냅니다.
RD-LNF는 pH 7.4(PBS)와 혈청(10% FBS) 조건 모두에서 우수한 안정성을 보였습니다(그림 3a). 연구 기간 동안 두 조건 모두에서 입자 크기가 유의하게 증가하지 않아 나노입자 안정성을 나타냅니다. 적시에 약물 방출 능력은 약물 로딩 나노입자 시스템의 효과를 결정합니다. 우리는 인산완충식염수(PBS, pH 7.4)에서 D-LNF와 RD-LNF의 DBZ와 ATRA 방출 동역학을 수행했습니다. 그림 3b에서 두 나노입자 시스템 모두에서 약물의 파열 방출이나 단계적 방출이 관찰되지 않아 나노입자 표면이 아닌 핵에 안정적으로 로딩됨을 나타냅니다. D-LNF와 RD-LNF에서 DBZ 방출에 유의미한 차이는 관찰되지 않아 ATRA 존재가 약물 방출 패턴을 늦추거나 변경하지 않음을 보여줍니다. RD-LNF에서 DBZ 약물 방출이 약간 지연될 수 있는데, 이는 지질 구조 내 ATRA로 인한 경로 길이 증가 때문일 수 있습니다. 흥미롭게도 RD-LNF 캐리어 시스템에서 ATRA가 DBZ보다 유의하게 느리게 방출되었습니다. 유의미한 차이는 24시간 후 72시간까지 나타나기 시작했으며, 주로 ATRA의 극도로 소수성인 특성과 구조적 구성요소 일부라는 점에 기인합니다. 전반적으로 파열 방출 부재와 치료 성분의 조절된 방출은 흑색종 암 치료에 이점을 줄 것입니다.
나노입자의 높거나 향상된 세포 섭취는 암 세포에서 치료 효능을 결정합니다. 우리는 B16F10 암 세포에서 RD-LNF 세포 섭취를 수행했으며 형광 추적자로 쿠마린-6을 사용했습니다. 그림 4에서 나노입자 배양 1시간 후 놀라운 내부화가 관찰되었고 섭취가 3시간까지 지속적으로 증가했습니다. 지질 기반 캐리어 시스템의 높은 세포 섭취와 일치하는 지질 나노제형의 놀라운 섭취입니다. 수동 확산과 내포작용 기반 메커니즘이 높은 세포 섭취를 담당할 것으로 추측됩니다. 내포작용 후 나노입자는 리소좀에 도달하여 캡슐화된 약물이 방출되고 각 약리 작용을 나타냅니다.
각 제형 처리 후 B16F10 세포에 MTT 분석을 수행하여 개별 치료제의 항암 효과를 평가했습니다(그림 5a). 먼저 자유 DBZ와 ATRA의 세포독성을 평가했습니다. DBZ는 흑색종 암 세포에서 농도 의존적 세포독성 효과를 보였으며 ATRA는 B16F10 세포에서 유의하게 더 높은 세포독성 효과를 보였습니다. 100 μg/mL에서 DBZ는 ~45% 세포 생존율을 보인 반면 ATRA는 ~22% 세포 생존율로 ATRA의 우수한 치료 효능을 나타냅니다. DBZ와 ATRA 공동 전달이 암 진행을 잠재적으로 억제할 수 있음을 입증하기 위해 DBZ+ATRA 로딩 지질 나노제형(RD-LNF)을 흑색종 세포에 처리했습니다. 단일 약물 DBZ 로딩 지질 나노제형(D-LNF)을 참조 그룹으로 사용하여 ATRA의 시너지 효능을 강조했습니다(그림 5b). 예상대로 25 μg/mL 고정 농도에서 ATRA가 DBZ보다 약간 낮은 세포 생존율을 보였으며 나노입자 기반 D-LNF는 DBZ 항암 효과를 개선하지 못하고 여전히 비효과적이었습니다. 예상대로 RD-LNF가 D-LNF에 비해 유의하게 낮은 세포 생존율과 더 높은 항암 효과를 보여 이중 성분의 흑색종 암 세포 사멸에 대한 명백한 시너지 치료 효과를 나타냈습니다. RD-LNF가 다른 모든 처리 그룹에 비해 유의하게 높은 항암 효과를 보였습니다. 나노캐리어 시스템에서 DBZ의 느린 지속적 방출과 ATRA의 느린 방출이 시너지 치료 효과에 기여할 것으로 예상됩니다. 본 연구에서 다카바진(DBZ)이 주요 화학요법 약물이고 ATRA는 지질 나노입자의 구조적 구성요소로 사용되어 별도 R-LNF 그룹을 만들지 않았습니다. 우리는 암 세포에서 순수 ATRA와 DBZ 항암 효과를 연구했습니다. 게다가 많은 발표된 보고서가 ATRA 항암 효과를 입증하므로 ATRA를 캡슐화된 치료제의 항암 효능을 시너지적으로 개선할 수 있는 구조적 구성요소로 사용했습니다.
흑색종 세포의 종양 형성 잠재력을 평가하기 위해 집락 형성 분석을 수행했습니다. 그림에서 자유 DBZ와 ATRA는 집락 형성 억제에 제한적 역할을 하며, 유사하게 D-LNF도 집락 형성 제어에 비효과적이었습니다(그림 6). 예상대로 DBZ+ATRA 병용이 개별 자유 약물이나 단일 약물 로딩 나노입자에 비해 집락 형성 억제에서 유의한 잠정 효과를 보였습니다. 집락 형성 분석은 자유 약물 대비 RD-LNF의 우수한 항암 효능을 다시 입증합니다.
D-LNF와 RD-LNF 처리 후 B16F10 세포의 세포자멸사 유도를 앤넥신 V-FITC/PI 혼합물 염색 후 유세포계로 연구했습니다(그림 7a). 보듯 ATRA와 DBZ는 암 세포의 10-12%만 세포자멸사시키고 대부분 세포는 온전하게 유지되었습니다. D-LNF 처리 후 초기 세포자멸사 세포가 약간 증가하여 전달 캐리어 효과를 시사할 수 있습니다. 중요하게, RD-LNF가 후기 세포자멸사와 초기 세포자멸사 세포 비율이 더 높게 더 많은 세포자멸사 세포를 유도하여 병용 나노입자의 우수한 항암 효능을 나타냈습니다. RD-LNF에서 후기 세포자멸사 세포가 21.5% 증가하고 초기 세포자멸사 세포가 18.3%까지 증가했으며 생존 세포 비율이 95%에서 52%로 감소하여 DBZ+ATRA 병용이 암 세포 세포자멸사에 기여하고 B16F10 흑색종 세포 증식 억제를 저해할 수 있음을 시사합니다. 세포자멸사 효과는 세포 주기 분석으로 추가 확인되었습니다. 그림에서 DBZ와 ATRA는 sub-G0 집단의 약간 증가를 보였으며 D-LNF는 개별 자유 약물에 비해 상대적으로 높은 sub-G0 집단을 보였습니다(그림 7b). 주목할 점은 RD-LNF 처리 흑색종 세포에서 sub-G0 집단의 현저한 증가가 관찰되어 암 세포의 현저한 세포자멸사를 나타냅니다. DBZ가 p21, 카스파제-3, 절단된 PARP 발현 수준을 증가시키고 p53 안정화를 통해 세포자멸사를 촉진하는 것은 잘 알려져 있습니다. p53 유도는 세포 주기 진행을 억제합니다[24, 25]. DBZ+ATRA 병용은 세포자멸사 메커니즘을 잠정하고 암 세포의 세포 주기 진행을 중단하여 항암 효능을 나타낼 것으로 예상됩니다.
트랜스웰 막을 통해 세포 이동을 분석하고 크리스탈 바이올렛 염색으로 이동 세포를 관찰했습니다(그림 8). 24시간 후 대조군 세포가 암 세포의 거의 완전한 이동을 달성했습니다. ATRA가 DBZ 처리 세포보다 상대적으로 세포 이동을 더 잘 억제하는 것으로 보입니다. D-LNF도 세포 이동에 주목할 만한 억제 효과를 보였으나, 가장 놀라운 세포 이동 효과는 RD-LNF 처리 B16F10 흑색종 세포에서 관찰되었습니다. 보듯 비처리 대조군 세포에 비해 다배 감소한 세포 이동이 관찰되었습니다. 이 결과는 RD-LNF가 비정상적 악성 세포 증식을 잠재적으로 감소시키고 세포 이동을 효율적으로 억제함을 명확히 입증합니다.
나노물질
초록 병용요법은 임상 종양 치료에서 표준 전략이 되었습니다. 우리는 테트라드린(Tet)과 시스플라틴(CDDP)의 병용이 현저한 시너지 항암 활성을 나타냄을 입증했지만, 불가피한 부작용이 치료 농도를 제한합니다. 두 약물의 상이한 물리화학적 및 약동학적 특성을 고려하여 개선된 이중 유화법으로 이들을 나노전달체에 함께 탑재했습니다. 나노입자(NPs)는 폴리(에틸렌글리콜)-폴리카프로락톤(PEG-PCL)과 폴리카프로락톤(HO-PCL) 혼합물로 제조되어 CDDP와 Tet가 동시에 NP 내에 위치할 수 있게 하여 낮은 간섭 효과와 높은 안정성
끊임없이 진화하는 재고 관리 세계에서 효율성 향상에 대한 관심은 지속됩니다. 모든 규모의 기업은 현재 역량을 정기적으로 평가하고, 기존 인프라에서 최대한의 효율성을 끌어내면서 성과를 새로운 차원으로 끌어올릴 신기술 도입을 준비합니다. 운영 관리자는 철저한 조사와 적절한 ROI 분석을 통해 모든 변화가 전체 운영에 미칠 영향을 완전히 이해하는 것이 그 어느 때보다 중요합니다. RFID 태그 정의 재고 관리에 RFID를 사용하려면 무선 주파수를 이용해 RFID 태그와 통신하는 스캐너가 필요합니다. 태그 자체에는 마이크로칩이 내장되어
