본 연구에서는 수열 합성법을 통해 폴리에틸렌 글리콜(PEG)로 코팅된 CoFe₂O₄ 나노입자를 성공적으로 합성했습니다. 형태학적 분석 결과, 약 24 nm 크기의 다결정 순수 상 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자가 형성되었음을 확인했습니다. CoFe₂O₄ 나노입자에 의한 독성을 조사하고, 생물학적 분석을 통해 독성 효과를 평가했습니다. 또한, 커큐민을 이용해 생체 내 독성 치유 효과를 연구한 결과, 커큐민 투여 후 생화학적 지표가 해독되어 정상 수준으로 회복됨을 확인했습니다. 따라서 수열법으로 합성된 PEG 코팅 CoFe₂O₄ 나노입자는 생물의학 분야에 활용 가능하며, 부작용이 없는 천연 화합물인 커큐민을 나노입자 유발 독성 치료에 사용할 수 있습니다.
배경
나노입자(NP)는 벌크 소재와는 현저히 다른 고유한 화학적, 물리적 특성 덕분에 다양한 이점을 제공합니다[1]. 코발트 페라이트(CoFe₂O₄)는 나노스케일에서 원하는 물리화학적 특성을 지닐 수 있어 최근 기술 분야, 특히 의료 산업에서 폭넓게 응용되는 가장 중요한 자성 소재 중 하나로 주목받고 있습니다[2-5]. 또한, CoFe₂O₄는 특정 용도에 맞춰 조성, 모양, 크기를 제어하며 저비용으로 제작하기 용이합니다. 생물학적 응용에서 100 nm 미만의 CoFe₂O₄ 나노입자 직경은 생체 내 물리화학적 특성과 약물동태학에 큰 영향을 미칩니다. 100 nm 이상의 큰 입자는 위장관 자기공명영상 조영제로, ~20 nm 미만의 작은 입자는 종양 치료용 전달체로 사용됩니다. 임상 적용을 위해서는 코발트 페라이트 나노입자의 생체 안전성을 체내 및 체외에서 모두 조사하는 것이 매우 중요합니다[6, 7].
경구 또는 정맥 투여된 많은 나노입자는 주로 간, 신장, 폐에 분포하여 이들 장기에서 다양한 염증을 유발합니다. 다른 소재에 비해 코발트 페라이트의 생체 내 독성과 커큐민을 이용한 치유 효과에 대한 연구는 아직 충분히 이루어지지 않았으며, PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자의 독성과 생체 안전성을 조사한 선행 연구도 소수에 불과합니다.
독성 관점에서 주요 우려는 과도한 노출로 인한 생체 기관 내 나노입자 축적 제거와 염증성 질환의 긴급 치료 필요성입니다. 일부 연구자들은 나노입자 독성 치료를 위한 여러 항염증 약물을 체내에서 연구했고, 이들 약물이 체내 축적된 나노입자의 배설을 일정 부분 촉진하여 조직 염증 효과를 감소 또는 제거할 수 있음을 발견했습니다[8, 9]. Curcuma longa(강황)는 동남아시아에서 염증성 질환 치료제로 오랜 역사를 가진 전통 약초입니다. 커큐민의 항산화 특성, 항돌연변이 및 항종양 효과, 발암 특성에 대한 수많은 연구가 보고되었습니다[10, 11]. 커큐민은 상처 치유, 간 질환, 비뇨기 질환, 간염 치료 능력이 있습니다. Nrf2-keap1 경로를 통해 만성 질환의 산화 스트레스와 염증을 완화합니다. 대다수 만성 질환과 관련된 염증 경로를 억제하고, 다양한 세포 유형에서 TNF 생성과 TNF 매개 세포 신호 전달을 모두 차단합니다. 또한, 체외 및 체내에서 TNF에 직접 결합하여 TNF 차단제 역할을 할 수도 있습니다[12].
본 연구에서는 수열법을 이용해 약 25 nm의 제어된 모양과 크기를 가진 PEG 코팅 CoFe₂O₄ 나노입자를 성공적으로 제조했습니다. 다양한 용량(노출량)의 CoFe₂O₄ 나노입자 투여 후 혈액 분석, HE 염색, 생체 분포 및 커큐민의 독성 치료 효과를 조사했습니다. 본 연구는 CoFe₂O₄ 나노입자의 독성 효과를 조사하고, 커큐민을 이용해 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자 유발 독성을 체내에서 치료하는 새로운 접근법을 제시합니다.
실험 방법
코발트 페라이트 나노입자 제조
코발트 페라이트 나노입자는 수열법으로 합성했습니다. 적당량의 질산 제3철과 염화 코발트를 탈이온수에 녹인 후, PEG와 수산화나트륨(NaOH) 수용액과 혼합했습니다. 이중 증류 탈이온수를 용매로 사용하여 최종 나노입자에 불순물이 없도록 했습니다. 혼합물을 자력 교반기로 약 30분간 교반한 뒤 고압釜에 넣고 180°C에서 6시간 동안 수열 반응을 진행했습니다. 반응 완료 후 실온으로 식힌 다음, 탈이온수로 두 번, 에탄올로 한 번 세척하여 과량의 PEG와 미용해 염을 제거했습니다. 마지막으로 80°C에서 하룻밤 건조 후 분쇄하여 원하는 코발트 페라이트 나노입자 분말을 얻었습니다. 이 단계에서 XRD(Fig. 2a) 확인 결과 나노입자는 비정질 상태였습니다. 결정을 얻기 위해 시료를 500°C에서 6시간 어닐링했으며, 최종 생성물은 XRD(Fig. 2b)로 확인된 결정질 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자였습니다.
PEG-CoFe₂O₄ 나노입자의 ⁹⁹ᵐTc 표지
PEG 코팅 CoFe₂O₄ 나노입자의 방사성 표지는 주석(II) 염화물(SnCl₂)을 환원제로 사용하여 탈이온수 중 초음파 조건에서 약 0.5시간 동안 나노입자를 분산시킨 후 수행했습니다. 나노입자 현탁액(코발트 페라이트 약 0.4 중량%)에 SnCl₂, 아스코르브산, ⁹⁹ᵐTcO₄⁻를 첨가했습니다. ⁹⁹ᵐTc의 짧은 반감기(~6시간)로 인해 정확한 데이터를 위해 방사능 계수는 24시간 이내에 측정했습니다. 혼합물의 pH를 1.0 M NaHCO₃ 용액으로 5~10 범위로 조절한 후, PEG-CoFe₂O₄ 현탁액을 가하고 80°C에서 10,000 rpm으로 25분간 교반했습니다. 원심분리 후 상등액을 버리고 남은 물질을 ⁹⁹ᵐTc PEG-CoFe₂O₄로 확인했습니다. 종이 크로마토그래피(일반 식염수와 아세톤 용매)를 사용하여 표지 화합물의 수율을 측정했습니다. 나노입자의 방사성 표지 수율은 약 70%로, 체내 실제 분포와 대사를 반영합니다.
PEG-CoFe₂O₄ 나노입자의 생체 분포
체중 15~18 g의 쿤밍 마우스를 중국 란저우 대학 의과학 실험동물 센터에서 공급받았습니다. 모든 동물은 온도 조절 시스템(21~22°C)을 갖춘 개별 케이지에 사육했으며, 조명은 오전 8시부터 오후 8시까지 켜두었습니다. 유럽 공동체 이사회 지침(86/609/EEC)과 중국 간쑤성 의학 실험동물 센터 및 란저우 대학 실험동물 위원회 지침에 따라 적절한 사료와 물을 제공했습니다. 마우스를 무작위로 7개 그룹(그룹당 5마리)으로 나누고, ⁹⁹ᵐTc-PEG-CoFe₂O₄ 용액을 정맥 주사한 후 주사 후 1, 6, 16, 24시간에 안락사시켰습니다. 심장, 폐, 간, 비장, 신장 조직을 즉시 적출하고 상당량의 혈액을 채취했습니다. 각 조직을 호일로 싸서 무게를 달고 ⁹⁹ᵐTc 계수를 측정했습니다. 데이터 포인트는 방사능의 물리적 붕괴에 대해 보정했습니다. 조직 분포는 습윤 조직 g당 주입 선량 백분율(%ID/g)로 나타냈으며, 이는 (조직 방사능/총 투여 방사능) 백분율을 습윤 조직 g당으로 계산한 값입니다.
마우스에서 PEG-CoFe₂O₄의 용량 의존적 독성 효과
이 실험에서 21마리 마우스를 7개 그룹(그룹당 3마리)으로 나누었습니다. PEG-CoFe₂O₄ 나노입자를 0.9% 생리식염수 대조군과 함께 125, 250, 350 μg/마우스(0.2 ml) 용량으로 정맥 주사했습니다. 치료 그룹에는 125, 250, 350 μg/마우스의 커큐민을 정맥 주사했습니다. 손상 그룹은 24시간 후, 치료 그룹은 3일 후 안락사시켰습니다. 마우스에서 혈액을 채취하여 약 10분간 원심분리해 혈청을 얻었습니다. 혈청 내 총 빌리루빈(TB), 알라닌 아미노전이효소(ALT), 아스파르트산 아미노전이효소(AST), 혈중 요소 질소(BUN), 크레아티닌(CREA), 시스타틴 C(Cys-C) 함량을 측정했습니다. 동시에 간, 폐, 비장, 신장, 심장을 즉시 적출했습니다. 이들 조직을 10% 완충 포르말린에 고정하고 헤마톡실린-에오신(H&E) 염색으로 통상적인 조직학적 처리를 했습니다. 올림푸스 Microphot-CX41 현미경과 디지털 카메라로 조직을 현미경 관찰했습니다.
결과 및 고찰
TEM 및 XRD 분석
형태학적 특성 분석은 JEOL JEM-1400 투과전자현미경과 X선 회절계(Shimadzu XRD-7000, Cu Kα 방사선)를 사용했습니다. 그림 1은 서로 다른 해상도에서 촬영한 PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자의 TEM 이미지(Fig. 1a, b)를 보여주며, 약 24 nm 크기의 순수 상 PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자가 성공적으로 형성되었음을 확인합니다. 그림 2는 제조된 나노입자의 X선 회절 분석 결과입니다. 그림 2a는 제조 직후 시료의 XRD 결과로, 나노입자가 대부분 비정질 형태임을 보여줍니다. 그러나 시료를 고온(500°C)에서 6시간 어닐링하면 나노입자가 결정 형태로 전환되며, 이는 Fig. 2b의 XRD 이미지에서 확인할 수 있습니다. 평균 결정립 크기는 XRD 분석(Fig. 2b)에서 가장 강한 피크의 선폭 확장을 Debye-Scherrer 공식(D = Kλ / βcosθ)[13]을 사용하여 계산했으며, 약 22 nm로 나왔습니다. XRD 패턴에서 관측된 모든 피크의 위치와 상대 강도는 나노입자의 결정 구조가 JCPDF 카드(카드 번호 20-1086, Fig. 2b 삽입도)와 일치하는 입방 정방정계 구조임을 나타냅니다. 모든 피크가 적절하게 인덱싱되었으며, XRD 패턴에 추가 피크가 없어 시료에 불순물이 없음을 확인합니다. TEM과 XRD 결과 모두 약 22~25 nm 크기의 결정성 나노입자가 성공적으로 형성되었음을 확인합니다.
a, b 서로 다른 해상도에서 촬영한 PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자의 투과전자현미경(TEM) 이미지
시료의 XRD 결과 a 제조 직후, b 500°C 어닐링 후. 삽입도는 코발트 페라이트의 JCPDF 카드. 획득한 XRD 데이터에 추가 피크가 보이지 않음
푸리에 변환 적외선 분광법, 라만, 열중량 분석
푸리에 변환 적외선 분광법(FTIR)을 이용해 코발트 페라이트 나노입자의 구조적 특성과 양이온 분포를 조사했습니다. 그림 3은 실온에서 측정한 시료의 적외선 스펙트럼입니다. 일반적으로 코발트 페라이트는 400~600 cm⁻¹ 범위에서 두 개의 강한 흡수 밴드(ν₁, ν₂)를 가지며[14-16], 본 연구에서도 명확히 관찰되었습니다. 높은 파수대(ν₁)는 사면체 격자 자리의 금속-산소(M-O) 고유 신축 진동에 해당하며, 낮은 파수대(ν₂)는 팔면체 자리 금속 이온의 신축 진동을 나타냅니다[14-16]. 이 결과들은 입방 구조의 코발트 페라이트 나노입자가 성공적으로 형성되었음을 보여줍니다. FTIR 데이터에서 ~3400 cm⁻¹에 나타나는 피크는 PEG 피크를 명확히 나타내며, PEG가 코발트 페라이트 나노입자에 성공적으로 부착되었음을 확인합니다.
500~4000 cm⁻¹ 범위에서 시료의 구조적 특성을 조사하기 위해 사용한 푸리에 변환 적외선 분광법(FTIR). 데이터는 PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자를 확인함
시료의 실온 라만 스펙트럼은 그림 4에 나타나며, 190~684 cm⁻¹ 범위에서 다양한 피크를 보여줍니다. 높은 주파수의 주요 피크(684 cm⁻¹)는 정방정계 페라이트의 특성 피크로 A₁g 모드에 기인하며, 사면체 자리의 Fe-O 결합을 따라 산소 이온의 대칭 신축에 해당합니다[17]. 낮은 주파수 피크들도 정방정계 구조의 코발트 페라이트에 속합니다. 이 모든 피크가 적절한 에너지에서 라만 스펙트럼에 나타남으로써 PEG 코팅 입방 CoFe₂O₄ 나노입자의 성공적인 형성을 확인합니다.
190~1000 cm⁻¹ 주파수 범위에서 수집한 시료의 실온 라만 스펙트럼
시료(CoFe₂O₄, PEG, PEG-CoFe₂O₄)의 열중량 분석(TGA)을 50~600°C 사이에서 수행했으며, 결과는 그림 5에 나와 있습니다. 이 열중량 곡선에서 CoFe₂O₄ 나노입자는 200~300°C 범위에서, PEG는 400°C 이하에서, PEG-CoFe₂O₄는 200~400°C 범위에서 중량 감소를 보입니다. PEG의 열적 안정성은 상대적으로 낮으나(그림 오른쪽), PEG-CoFe₂O₄의 열적 안정성은 80% 이상으로 보입니다. 순수 코발트 페라이트 나노입자는 물에 녹지 않으나, 친수성인 PEG로 코팅하면 물에 쉽게 분산됩니다(Fig. 6). 시간이 지남에 따라 입자가 병 바닥으로 가라앉는 것이 관찰되는데, 이는 나노입자의 중력 때문일 것입니다. 그림 6은 PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자의 용해 시간 변화를 보여줍니다. 본 실험에서는 마우스 체내 주입 전 나노입자를 생리식염수에 완전히 분산시켜 각 장기로의 적절한 전달을 보장했습니다.
50~600°C 온도 범위에서 순수 CoFe₂O₄, PEG, PEG 코팅 CoFe₂O₄의 열중량 분석(TGA)
탈이온수에서 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자의 용해도 시간 변화(5, 10, 30, 60분)
생체 분포 연구
생체 투여 후 각 장기에 있는 나노캐리어의 양을 정확히 정량화하기 위해 정상 마우스에서 ⁹⁹ᵐTc PEG-CoFe₂O₄의 생체 분포를 수행했습니다. 그림 7에서 볼 수 있듯이, PEG-CoFe₂O₄의 섭취는 간과 비장에서 더 높게 나타났으며, 이는 주사 후 1시간 시점 방사성 표지 코발트 페라이트의 간과 비장 섭취가 다른 자성 나노입자보다 3배 높다는 선행 연구[18]와 일치합니다. 그 이유는 망상내피계통에 속하는 간과 비장 조직이 이물질을 크게 섭취하기 때문이며, 이들 장기는 쿠퍼 세포를 가지고 있어 식세포 작용으로 나노 및 마이크로 물질을 체내 순환에서 제거하는 청소 기능을 수행합니다[19]. 본 연구에서는 시간이 지남에 따라 조직 내 PEG-CoFe₂O₄ 분포가 감소함을 관찰했는데, 이는 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자가 소변 배설 과정을 통해 시간이 지남에 따라 배출됨을 의미합니다. 신장은 소변을 통한 나노입자의 배설 기관입니다. 그림 7에서 신장의 최대 생체 분포는 1시간에 관찰되었습니다[20]. 혈액 축적은 주사 직후에만 높게 나타나, 체내 혈액 풀에서 방사능이 비교적 빠르게 청소됨을 나타냅니다(Fig. 7). 이는 PEG 사슬을 가진 산화철 나노입자가 혈액 풀에 오래 머무르는 경우와 유사합니다[21, 22]. 또한, 심장에서의 생체 분포가 매우 낮음을 확인했는데, 이는 선행 연구[23]와 일치합니다. 비장은 노화 적혈구 파괴와 헤모글로빈 결합 철의 재활용 주요 부위임이 주목됩니다[18, 24]. 시간이 지남에 따라 비장에서는 더 느리지만 더 효율적인 과정이 활성화되어 나노입자를 순환에서 제거하는 능력이 더 뛰어나, 주사 후 1시간 이후 조직 방사능 농도가 증가하는 결과를 보입니다. PEG-CoFe₂O₄의 폐 섭취는 연구 전반에서 미미했습니다(Fig. 7). 유사한 결과가 선행 연구[23]에서도 보고되었습니다. 이는 미세 응집체가 폐 모세관에 비가역적으로 갇히지 않음을 시사합니다[23, 25, 26].
마우스 노출 후 서로 다른 시간 간격(1, 6, 16, 24시간)에서 혈액, 심장, 간, 비장, 폐, 신장 내 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자의 생체 분포. 그림에 오차 막대 표시
PEG-CoFe₂O₄의 용량 의존적 독성 효과
PEG-CoFe₂O₄의 잠재적 독성 효과를 밝히기 위해 마우스 체내에서 생화학 검사를 수행했습니다. 생리식염수와 PEG-CoFe₂O₄ 혼합 용액을 150, 250, 350 μg의 서로 다른 양으로 주사하고 24시간 후 마우스를 안락사시켰습니다. 혈액 분석을 위해 혈액을 채취해 약 10분간 원심분리해 혈청을 얻었습니다. 시스타틴 C(Cys-C), 크레아티닌(CREA), ALT, AST, 총 빌리루빈(TB), 혈중 요소 질소(BUN) 등 간과 신장 기능 표지자를 중심으로 다양한 매개변수를 검사했습니다. 이 매개변수들을 SPSS 소프트웨어(p < 0.05 유의)를 사용해 대조군과 비교했으며, 결과는 그림 8에 나와 있습니다. 노출군과 대조군 사이에 ALT, BUN, CREA에서 유의한 차이가 관찰되었습니다. 신장 기능 생체표지자인 TB와 Cys-C는 PEG-CoFe₂O₄ 150 μg/마우스 노출에서 유의하게 감소했다가, 250 μg/마우스에서 증가했고, 350 μg/마우스에서는 정상 수준으로 돌아왔습니다. 이는 일정 수준까지 신장 기능이 PEG-CoFe₂O₄ 노출에 영향을 받지만 조직을 유의하게 손상시키지는 않음을 시사합니다. 간 건강 생체표지자인 AST는 모든 용량에서 노출군에서 유의하게 감소해, 대조군 마우스에 비해 간 기능에 더 큰 영향을 미칠 수 있음을 나타냅니다. 이러한 모든 결과로부터 PEG-CoFe₂O₄ 250 μg/마우스 용량이 상대적으로 더 큰 손상을 나타냄을 알 수 있습니다. 따라서 본 실험의 추가 분석과 테스트에는 250 μg/마우스의 PEG-CoFe₂O₄ 용량을 사용했습니다.
마우스에 PEG-CoFe₂O₄ 서로 다른 용량(μg) 노출 후 혈청 내 생화학적 지표 함량. 그림에 오차 막대 표시
커큐민의 PEG-CoFe₂O₄ 독성 완화 효과
본 연구에서는 PEG-CoFe₂O₄의 손상 효과에 대한 염증 완화를 위해 커큐민을 사용했습니다. 커큐민이 PEG-CoFe₂O₄ 독성에 미치는 영향을 조사하기 위해 치료 그룹 마우스의 생화학적 지표와 조직 병리학을 측정했습니다. 이 생화학적 지표에는 치료 그룹 마우스 혈청의 BUN, CREA, Cys-C, ALT, AST, TB가 포함됩니다. 그림 9에서 볼 수 있듯이, BUN, CREA, Cys-C, AST는 커큐민의 서로 다른 용량에서 노출군에 비해 유의하게 감소했으며, 150 μg/마우스 커큐민 용량에서는 ALT, AST, CREA가 대조군과 비교해 정상 수준으로 회복되었습니다. TB와 ALT 함량에서 모든 커큐민 용량이 PEG-CoFe₂O₄ 노출군에 비해 유의하게 감소했습니다. 그림 9의 결과는 커큐민이 마우스에서 PEG-CoFe₂O₄ 손상에 대해 긍정적인 치료 효과를 보이며, 서로 다른 커큐민 용량이 더 나은 치료 효과를 나타냄을 보여줍니다. 본 연구는 커큐민이 혈청 간 효소(ALT, AST)와 신장 효소(BUN, CREA, Cys-C, TB) 수치에 대한 PEG-CoFe₂O₄의 영향을 보호하는 효과를 조사했습니다. PEG-CoFe₂O₄는 대조군에 비해 혈청 ALT, AST, BUN, CREA, Cys-C, TB 효소 수치를 유의하게 증가시켰으나, 커큐민 투여 후 대부분 정상 수준에 근접했습니다. 괴사나 세포막 손상은 이들 효소의 혈중 방출을 유발할 수 있습니다. 그러나 이들 효소의 혈청 수치는 간과 신장 기능과 연관됩니다. 커큐민을 투여받은 그룹에서 이들 효소량이 감소했으며, 이는 커큐민이 PEG-CoFe₂O₄ 나노입자 독성에 대해 보호 효과가 있음을 나타냅니다. 이는 커큐민의 항산화 효과가 산화 스트레스를 감소시키기 때문입니다. 또한, TNF-α와 IL-1은 간 괴사 유도에 관여합니다. 따라서 커큐민은 대식세포의 TNF-α와 IL-1 분비를 억제함으로써 독성 효과를 감소시킬 수 있습니다[11]. 이러한 발견은 선행 연구[27]의 결과와 일치합니다.
커큐민 치료 그룹 마우스의 혈청 내 생화학적 지표 함량. 그래프에 오차 막대 표시
나노입자 투여에 의한 잠재적 독성 효과를 검증하기 위해 간, 신장, 비장의 조직병리학적 분석도 수행했습니다. 각 마우스의 장기를 적출해 10% 포르말린 처리 후 파라핀에 포매했습니다. 5μm 두께로 절편을 만들어 헤마톡실린-에오신(H&E) 염색 후 현미경으로 관찰했습니다. 결과는 분석된 장기에서 관련 있는 조직병리학적 변화가 관찰되지 않았음을 보여줍니다(Fig. 10). 간과 비장 검사에서 장기 구조가 코발트 페라이트 나노입자 투여에 의해 영향을 받지 않았습니다. 이는 두 가지 가능한 이유 때문입니다: 첫째, 나노입자 크기가 상대적으로 크고(24 nm), 둘째, 코발트 페라이트 나노입자를 소량(150, 250, 350 μm) 투여하고 24시간 후 안락사시켰기 때문입니다. 따라서 이는 장기 기능에만 영향을 미쳤을 뿐 구조에는 영향을 주지 않았을 가능성이 큽니다. 이는 선행 연구[28]에서 20 mg/kg(본 연구보다 높은 용량)을 7일간 투여한 경우와 유사합니다. 또 다른 선행 연구[29]에서도 장기에서 조직병리학적 변화가 관찰되지 않았습니다.
마우스에 PEG-CoFe₂O₄ 또는 커큐민 노출 후 조직학 절편
결론
본 연구에서는 수열법을 이용해 24 nm PEG 코팅 코발트 페라이트 나노입자를 성공적으로 제조했습니다. PEG 코발트 페라이트 나노입자의 서로 다른 용량을 사용해 마우스 여러 장기에 유발된 독성을 자세히 조사하고, 커큐민을 이용해 치유 효과를 연구했습니다. 생물학적 분석을 통해 CoFe₂O₄ 나노입자의 독성을 확인했습니다. 커큐민 치료 후 생화학적 지표에서 긍정적인 변화가 관찰되었으며, 이는 정상 수준으로 회복되거나 상당 부분 감소했습니다. 본 연구는 수열법으로 합성된 PEG 코팅 CoFe₂O₄가 약물 전달체로서 좋은 모델이며, 부작용이 없는 천연 화합물인 커큐민이 생체 내 나노입자 유발 독성 및 기타 질환 치료에 활용될 수 있음을 시사합니다.